Tres acordes imponentes y sombríos dan inicio al drama por venir. Primero la voz de Angelotti, un revolucionario escapando de las autoridades, aterrado porque está huyendo de la prisión y se esconderá en la Iglesia de Santa Andrea del Valle. La acción se desarrolla en la Roma de 1800. Luego el Sacristán quejándose de tener que limpiar los pinceles del pintor Mario Cavaradossi. En ese momento llega el artista y habla del cuadro que está pintando, una María Magdalena, cuyo rostro es sumamente parecido al de una bella mujer que el Sacristán ve llegar los domingos al servicio y que el pintor no sabe que es la hermana de su amigo Angelotti. Vuelve a mirar el cuadro, y canta la famosa aria “Recondita Armonía de bellezas diversas, es morena Floria la ardiente amada mía…” Ingresa Tosca en la estancia, alcanza a mirar el cuadro que pinta su amado…
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